¿Qué es la electroforesis?

La electroforesis es la migración de proteínas, moléculas u otras partículas cargadas eléctricamente, disueltas o suspendidas en un electrolito a través del cual se pasa una corriente eléctrica.

Precauciones en la electroforesis

Los voltajes utilizados en electroforesis pueden proporcionar descargas eléctricas letales. El peligro se incrementa por el uso de soluciones acuosas reguladoras y la posibilidad de trabajar en ambientes húmedos.

A excepción de la fuente de poder, el equipo debe estar dentro de una caja metálica o en una caja de material aislante. La caja debe tener un aditamento que permita apagar la fuente de poder en caso de ser abierta.

Los cables de alto voltaje que unen la fuente de poder y el aparato deben ser de metal trenzado y protegido. Cubierto completamente la parte central aislada del conductor el cual debe estar aterrizado.

La base del aparato debe estar conectada a tierra de tal forma que cualquier escape de la solución electrolitos produzca un corto que desactive la fuente de energía.

Debido a los peligros potenciales asociados a la electroforesis, el personal del laboratorio que maneje esta técnica debe estar completamente familiarizado con el equipo y el proceso antes de aplicarlo.

Equipos para electroforesis

El aparato para electroforesis consiste de:

Fuente de poder adecuada que administre una corriente constante directa y aditamentos para indicar y controlar tanto el voltaje de suministro como el consumo de corriente, se puede adicionar un circuito que estabilice la salida de corriente (regulador de voltaje).

Ensamble electroforético con aditamentos especiales para soportar las placas electroforéticas. Para las electroforesis donde se utilice papel, gel de agar, gel de agarosa-almidón o acetato de celulosa como soporte electroforético, el ensamble consiste en un tanque con tapa de vidrio o de algún otro material que permita el cerrado hermético. El tanque contiene aditamentos de seguridad los cuales desconectan la fuente de energía cuando la tapa se quita, además dos dobles canales en cada extremo provistos de una parte divisoria central.

A lo largo del fondo de los compartimentos de cada doble canal se encuentra un electrodo de platino conectado por medio de cables aislados y sellados a las paredes del tanque, al cable externo conectado a la fuente de poder.

Los canales se llenan con la suficiente cantidad del  electrolito especificado en la monografía, para asegurar la inmersión completa de los electrodos.

El contacto entre el compartimiento interno y el externo de cada doble canal puede ser por medio de un puente  de papel electroforético o bien mediante pequeñas perforaciones de la parte central divisoria.

Para electroforesis en gel de agar y en gel de agarosa-almidón el tanque está diseñado para permitir cierta ventilación y evitar la condensación de la humedad o que la capa del medio sólido se seque.

Para electroforesis en gel de poliacrilamida el ensamble consiste en dos recipientes de polimetilmetacrilato para la solución reguladora, conteniendo cada uno un electrodo de platino. El recipiente superior está montado arriba verticalmente del inferior y su altura es ajustable. En su base, tiene una serie de soportes de hule equidistantes del electrodo.

Soporte electroforético

Para electroforesis en papel y en acetato de celulosa, el soporte electroforético es en forma de tiras sostenidas entre los canales sobre una superficie uniforme compuesta de puntos de contacto de plástico inerte o vidrio, espaciados para minimizar la difusión capilar de la solución de electrolitos.

Para electroforesis en gel de agar y de agarosa-almidón, el soporte electroforético es en forma de capa de gel de 6mm de grosor sobre una placa de vidrio la cual, se coloca sobre una placa cóncava metálica a través de la cual puede ser circulado un líquido congelante y la superficie superior de la cual esta sujeta para permitir un contacto íntimo con la placa de vidrio.

El soporte electroforético se conecta tanto directamente como indirectamente por medio de mechas de un material adecuado, al compartimiento de cada doble canal donde no contiene el electrodo.

Para electroforesis en gel de poliacrilamida, el soporte electroforético es en forma de gel contenido en tubos de vidrio limpios de 7.5 cm de longitud y 0.5cm de diámetro interno.

Dado que en la electroforesis es crucial el buen funcionamiento de la cámara electroforética, tanto para prevención de accidentes como para la separación adecuada de los analitos, es importante que la cámara sea verificada al menos dos veces al año, ICLAB cuenta con ingenieros de servicio capacitados para tal efecto.

Instrumentos Científicos y de Laboratorio (ICLAB) es una empresa dedicada a la calibración de instrumentos de medición tales como: espectrofotómetros, potenciómetros,  viscosímetros, balanzas, básculas, manómetros, entre otros.

El personal de ICLAB está ampliamente capacitado para dar un servicio y asesoría a la mayoría de los instrumentos existentes en el mercado.

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Las bombas centrífugas horizontales y verticales

El eje de rotación puede ser horizontal o vertical, (rara vez inclinado). De esta disposición se derivan diferentes diseños en la construcción de la bomba.

Bombas centrífugas horizontales

El eje de la bomba y del motor están a la misma altura. La bomba no debe trabajar en seco, ya que necesita el líquido bombeado como lubricante entre anillos rozantes y rodete, y entre empaquetadura y eje.

Antes de su puesta en marcha deben quedar cebadas por no ser auto-transpirantes. Este proceso puede ser bastante complejo si la bomba no trabaja en carga y colocada por encima del nivel del líquido. Este caso se presenta muy frecuente con bombas centrífugas horizontales, se debe colocar una válvula en la parte de la aspiración de la bomba t algún sistema de cebado.

Ventajas de las bombas centrífugas horizontales

En la gran variedad de las bombas centrífugas horizontales encontramos las siguientes ventajas.

• Son de construcción más barata que las verticales.
• Su mantenimiento y conservación es mucho más sencillo y económico.
• El desmontaje de la bomba se puede hacer sin necesidad de mover el motor.
• No hay que tocar las conexiones de aspiración e impulsión.
• Fácil de instalar.

Bombas centrífugas verticales

En este tipo de bomba tiene un eje vertical y el motor generalmente está encima de la bomba. Esto permite que la bomba trabaje siempre rodeada por el líquido a bombear. Estas bombas no deben quedar cebadas antes de la puesta en marcha.

Bombas centrífugas verticales no sumergidas

En las bombas verticales no sumergidas, el motor generalmente está directamente encima de la bomba. También puede estar muy por encima de la bomba para protegerlo de una posible inundación o para hacerlo más accesible.

El eje de la bomba puede ser rígido o flexible por medio de juntas universales. Esto soluciona el problema del alineamiento.

Se puede usar las mismas bombas horizontales, solamente hay que modificar los cojinetes.

La ventaja de las bombas verticales es que necesitan muy poco espacio horizontal, son ideales para trabajar en barcos, pozos, etc. Se debe prever suficiente espacio vertical para su montaje y desmontaje.

Para bombas de gran capacidad, la construcción vertical generalmente es menos cara que la horizontal.

Las bombas centrífugas verticales no sumergidas tienen su campo en:

• Aplicaciones marinas.
• Aguas sucias.
• Drenajes.
• Irrigación.
• Circulación de condensadores, etc.

Proveedores de bombas centrífugas

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Calificación de desempeño de cámaras climáticas o cuartos de estabilidad

Parte 2

El contenido de un protocolo de calificación de cámaras climáticas o cuarto de estabilidad comprende:

En esta segunda parte, detallaremos la información cuantitativa de un protocolo de calificación de cámaras climáticas, que comprenden:

1. Materiales, equipos e instrumentos.

Este apartado se refiere a todas las herramientas utilizadas para llevar a cabo la calificación de desempeño de una cámara climática o cuarto de estabilidad, por ejemplo los registradores de temperatura y humedad utilizados, estos deben de contar con la calibración vigente, contener el cálculo de la incertidumbre y presentar la trazabilidad correspondiente.

2. Criterios de aceptación.

Son aquellas características con las cuales debe de cumplir el estudio de estabilidad, por ejemplo:

Abordando la cuestión de número de sensores a colocar dentro de la cámara climática o cuarto de estabilidad, para registrar la temperatura y humedad, la bibliografía sugiere utilizar entre 15 y 20 sensores para la calificación de procesos asépticos (por ejemplo esterilización).

La siguiente cuestión es ¿Cómo acomodamos o distribuimos este número de sensores dentro de la cámara climática o cuarto de estabilidad? Para contestar esta pregunta, tenemos tres posibilidades:

• Colocar los sensores al azar: Al colocarlos al azar se evita manipular el estudio, colocando los sensores en aquellas zonas donde sabemos que la cámara climática o cuarto de estabilidad se comporta dentro de especificaciones, pero puede descuidar aquellas zonas donde es más difícil para la cámara o cuarto de estabilidad alcanzar las condiciones dentro de especificaciones.
• Colocar los sensores en posiciones fijas: Al colocarlos en posiciones fijas tenemos la ventaja de cubrir las zonas de más difícil acceso para la temperatura o humedad. Lo que nos garantiza que si cumple en estas zonas, es más fácil que cumpla con las demás zonas donde se localice producto.
• Una combinación de las dos anteriores. Es decir, una cantidad de sensores en posición fija y una cantidad de sensores colocados al azar. Una combinación de las anteriores opciones, reúne las ventajas que cada una tendría por si sola.

3. Análisis estadísticos.

La incertidumbre es una medida de la duda que se tiene sobre el valor de la medición, la duda nunca es cero.

La incertidumbre proporciona información de gran utilidad en el empleo del resultado de la medición, por ello, es tan errónea una subestimación como una sobreestimación de la incertidumbre, por tanto, quienes calificamos el desempeño de las cámaras climáticas debemos incluir este resultado como parte del protocolo de calificación. La calidad del resultado de medición, se juzga por su grado de representatividad y del análisis que deriven de este cálculo para optimizar el proceso de estabilidad.

Comercialización e Integración de Tecnología S. A. de C. V. (CITEC ING), brinda apoyo a la industria en general basando sus servicios en el entusiasmo por colaborar al crecimiento de las empresas a través de sus servicios especializados y personal altamente capacitado.

Lo descrito anteriormente es un extracto de la metodología que CITEC-ING, S.A. de C.V. está proponiendo y usando en las empresas que contratan sus servicios para calificar el desempeño de sus cámaras climáticas.

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¿En qué consiste la validación de una cámara climática o cuarto de estabilidad?